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柱填料的选择关系到色谱分离的可能性,而柱规格的选择直接影响分析速度、分离能力、检测能力及每次分析的溶剂消耗等。
柱规格包括两方面:柱内径和柱长度。柱内径,分析型一般为2~6 mm,制备型20 mm,大者可达80 mm;柱长度,分析型5~30 cm,制备型15~50 cm。
一般来说,柱内径不影响分离度与分析时间的关系。今天,柱技术已发展到不同柱内径的柱子能够具有相同的性能。不同内径的柱子又各具特点,对相同的分析时间和分离度来说,内径大的柱子比内径小的柱子多消耗溶剂。另一方面,较小内径的柱子对相同的检测信号来说所需样品量亦较少。
因此,在样品量有限i时,可使用小内径柱。柱长度增加虽可---分离效果,但阻力也随之增加,必须提高入口压力。柱压是同时影响增加分离度和减少分析时间的主要障碍。分离度、分析时间及柱压三者相互制约,标准流速泵消耗品耗材,选择好其中两者,则第3个因素也就选好了。长柱可以给出高分离度,短柱可提供快速分离,我们可以根据样品情况去选用合适的色谱柱。
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对于粒径较大的填料(多用于制备色谱),标准流速泵消耗品一级代理,如粒径***20μm的填料,可以用干法装填,其基本方法与填装气相色谱柱类似。但需注意的一点是,在干法填装制备液相色谱柱时,不要过分剧烈地振动和敲打。振动和敲打会使填料因自身粒径的不均匀性而产生柱子整体上的不均一性,即较大的填料粒子靠近柱壁,而较细粒径者则倾向集中于柱中心。这种柱内颗粒分布的不均匀性,标准流速泵消耗品批发,会导致柱效的降低。比较好的方法是采用小量多次的方法向柱内加入填料,例如每次加入相当于3-5mm柱床的填料,装一点即在实验台或桌面上垂直地轻轻磕几十下,广东标准流速泵消耗品,续加一些填料后,重复上述操作,直至填装完成。
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一支色谱柱的优劣需要用一定的技术指标来进行评价。一个合格的色谱柱评价报告应该给---谱柱的各项基本参数包括填充载体的种类、柱长内径、柱效、粒度等方面。评价液相色谱仪色谱柱的系统应满足相当高的要求,一方面是色谱仪器设备系统的中死体积应尽可能小,另一方面是其采用的试样样品以及操作条件应当合理,在此合理条件下色谱柱的试样样品可以完全分离并有适当的保留时间。
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